Un espectrofotómetro de fluorescencia, también conocido como fluorómetro o espectrofluorómetro, es un instrumento utilizado para analizar la fluorescencia de una muestra. Funciona mediante el uso de un haz de luz, generalmente luz ultravioleta, que excita los electrones de las moléculas de ciertos compuestos y hace que emitan luz.
El proceso implica los siguientes pasos:
- La especie que se examina primero se excita, absorbiendo un fotón, desde su estado electrónico fundamental a uno de los diversos estados vibratorios en el estado electrónico excitado.
- Las colisiones con otras moléculas hacen que la molécula excitada pierda energía vibratoria hasta que alcance el estado vibratorio más bajo del estado electrónico excitado.
- Luego, la molécula vuelve a descender a uno de los distintos niveles vibratorios del estado electrónico fundamental, emitiendo un fotón en el proceso.
Como las moléculas pueden caer a cualquiera de los varios niveles de vibración en el estado fundamental, los fotones emitidos tendrán diferentes energías y, por lo tanto, frecuencias. Por tanto, analizando las diferentes frecuencias de la luz emitida en espectroscopia fluorescente, junto con sus intensidades relativas, se puede determinar la estructura de los diferentes niveles vibratorios.
Esta técnica se utiliza en diversos campos, incluidos los sistemas biológicos, donde analiza el estado de un sistema mediante el estudio de sus interacciones con moléculas sonda fluorescentes. También se utiliza en dispositivos como el espectrofluorómetro Agilent Cary Eclipse, que mide fluorescencia, fosforescencia, bioluminiscencia y quimioluminiscencia.
La función de un espectrofotómetro de fluorescencia es medir la intensidad de la luz emitida por una sustancia después de haber sido excitada por una determinada longitud de onda de luz. Este método se emplea para investigar las características de las moléculas y detectar la presencia de sustancias químicas específicas en una muestra. La espectrofotometría de fluorescencia tiene amplias aplicaciones en diversos campos.
Excitación: Se utiliza un haz de luz específico, predominantemente en el rango ultravioleta, para estimular los electrones presentes en determinados compuestos moleculares.
Emisión: tras la excitación, estos electrones liberan luz, a menudo dentro del espectro visible.
Química: Se utiliza para investigar las características de las moléculas e identificar sustancias desconocidas.
Esta técnica se distingue de la espectroscopia de absorción, otro enfoque que investiga las propiedades de absorción de luz de las moléculas.
Los modelos comunes de espectrofotómetros de fluorescencia que tenemos son F93, F96S, F96PRO, F97PRO y F98. Háganos saber si necesita más información.